Luminescensmikroskopi: studiefunksjoner

Innholdsfortegnelse:

Luminescensmikroskopi: studiefunksjoner
Luminescensmikroskopi: studiefunksjoner
Anonim

Begrepet "mikroskopi" har greske røtter. I oversettelse betyr det studiet av objekter ved hjelp av høypresisjonsinstrumenter. I det siste har fluorescens og elektronmikroskopi blitt stadig mer populært.

fluorescensmikroskopi
fluorescensmikroskopi

Oppløsning

Under den forstår de som regel minimumsavstanden som klart gjenkjennelige objekter kan befinne seg på. Graden av penetrering i den mikroskopiske verden, evnen til å vurdere størrelsen på elementet som studeres vil avhenge av oppløsningen til utstyret. Ved høy forstørrelse kan grensene til objekter smelte sammen. Følgelig er det visse grenser utover hvilke tilnærming av elementer er meningsløs.

Luminescensmikroskopimetode: mekanisme

Når energien som absorberes av et stoff omdannes til synlig stråling, oppstår en glød. Det kalles luminescens. Dette fenomenet skyldes det faktum at noen stoffer, under påvirkning av lys, begynner å sende ut stråler med en annen (vanligvis stor) bølgelengde. I tillegg noen gjenstander som under normal belysning har en vissfarge, under påvirkning av ultrafiolett endre farge.

fluorescensmikroskopi metode
fluorescensmikroskopi metode

Spesifikk

En gjenstand som ikke kan sees under ultrafiolett lys kan avgi en lys glans hvis den behandles med et spesielt stoff. I den lyser elementene i forskjellige farger i mørket. Styrken på strålingen er forskjellig, men som regel er den liten. I denne forbindelse er fluorescensmikroskopi effektiv i et mørklagt rom. Når du bruker denne typen studier, blir objektet sett i lyset som det selv sender ut. Den kjemiske sammensetningen av vev, celler vil påvirke kvaliteten på studien. Fluorescensmikroskopi anses til en viss grad å være en histokjemisk studie.

klassifisering

Fluorescensmikroskopi kan være primær eller sekundær. I sistnevnte tilfelle behandles objektet med spesielle forbindelser som gir en glød. Primær fluorescerende mikroskopi er basert på grunnstoffets egen evne til å sende ut lys.

fluorescerende og elektronmikroskopi
fluorescerende og elektronmikroskopi

Utstyr

Fluorescensmikroskopi utføres ved hjelp av en rekke enheter. Hovedelementet deres er illuminatoren. Den er utstyrt med en UV-lampe. I tillegg bruker enhetene et sett med filtre. I noen enheter er det ganske mange forskjellige konfigurasjoner. Avhengig av hvilken farge som brukes for å begeistre luminescens - ultrafiolett eller blått, plasseres et passende filter mellom lyskilden og objektet som studeres. Siden gløden til et mikroskopisk element er energetisk svakere enn det spennende lyset, vil det bare fanges under én betingelse. Overflødige stråler fra kilden må kuttes av et gulgrønt filter. Den er plassert på okularet til enheten. Den mest utt alte effekten av luminescens vil være når filteret fullstendig kutter av strålene som kommer fra lyskilden.

Hva består en synlig lysinstallasjon av? Den inneholder en skarp lyskilde og et biologisk mikroskop. Et blåfiolett filter er plassert mellom speilet på enheten og lampen. Det kan være FS-1, UFS-3 og så videre. Det gule filteret settes på okularet til mikroskopet. Med deres hjelp faller blåfiolett lys på objektet. Det begeistrer luminescens. Men dette lyset kan forstyrre å se gløden. Derfor, på vei til øyet, blir den avskåret av et gult filter. Belysning stilles inn etter Koehler-metoden, med ett unntak. Kondensatormembranen må være helt åpnet. Ved undersøkelse er det viktig å bruke en ikke-fluorescerende nedsenkingsolje. For å redusere sin egen glød tilsettes nitrobenzen (2-10 dråper / 1 g).

fluorescensmikroskopi
fluorescensmikroskopi

Luminescensmikroskopi: anvendelser i mikrobiologi

Fordelene med denne typen studier er:

  1. Fargebildefunksjon.
  2. Selvutsendende elementer med høy kontrast på svart bakgrunn.
  3. Deteksjon og lokalisering av visse typer virus og mikrober.
  4. Evnen til å studere gjennomsiktig og ugjennomsiktiglevende organismer.
  5. Studium av livsprosesser i deres dynamikk.

Det skal også sies at selvlysende mikroskopi bidrar til utviklingen av de fineste metodene innen histo- og cytokjemi, ekspressdiagnostikk.