Radioimmunanalyse i mikrobiologi: applikasjon, mekanisme

Innholdsfortegnelse:

Radioimmunanalyse i mikrobiologi: applikasjon, mekanisme
Radioimmunanalyse i mikrobiologi: applikasjon, mekanisme
Anonim

Moderne medisin har spesifikke diagnostiske metoder som gjør det mulig å fastslå etiologien til sykdommer hos mennesker basert på definisjonen av patogenet, genetisk fremmede stoffer som stimulerer immunresponsen, nukleinsyrer, samt allergiske og immunforandringer som oppstår på grunn av hans handlinger. I dag er RIA mye brukt i immunologi og virologi, det vil si radioimmunoassay, målene for å sette, komponenter, kurset, regnskapet som vi vil vurdere i denne artikkelen. Denne analysen er i stand til å oppdage antigener som et resultat av deres interaksjon med antistoffer.

radioimmunoassay
radioimmunoassay

Definition

RIA er en metode for å diagnostisere biologisk aktive stoffer i væsker, som er basert på reaksjon av antigener med antistoffer ved bruk av radionuklidmerkede analoge stoffer som har spesielle bindingssystemer. Etter deres samhandlingdet dannes et immunkompleks som separeres og radioaktiviteten studeres. Det er kjent at radioimmunoassay utføres ved bruk av standard reagenssett.

Hver reagens er i stand til å bestemme konsentrasjonen av ett spesifikt stoff. Den biologiske væsken tatt fra en person blandes med et reagens, etter inkubasjonsperioden separeres de frie og bundne radioaktive stoffene, deretter utføres radiometri og resultatene beregnes. En isotop av jod brukes til å merke stoffer. Den er merket og lagt til i et visst beløp.

radioimmunoassay mikrobiologi
radioimmunoassay mikrobiologi

Application

Radioimmunanalyse har en bred anvendelse innen medisin og mikrobiologi. Det brukes til å diagnostisere hjerte- og karsykdommer, sykdommer i endokrine og andre kroppssystemer. RIA-er brukes også ofte til å identifisere årsaken til infertilitet, patologien til fosterutvikling. I onkologi utføres denne analysen for å bestemme markørene for neoplasmer for å kunne overvåke effektiviteten av behandlingen. I immunologi brukes RIA til å studere tilstedeværelsen av immunglobuliner, enzymer, proteiner og så videre i blodet. I dag lar denne analysen deg oppdage konsentrasjonen av ulike hormoner opptil en milliondel av ett gram. Radioimmun blodanalyse er derfor mye brukt innen kardiologi, onkologi, endokrinologi, gynekologi og virologi.

radioimmunoassay-applikasjon
radioimmunoassay-applikasjon

RIA-metoder

Det er vanlig å skille mellom flere analysemetoder, avhengig av artenreaksjoner:

  1. Den ikke-konkurrerende metoden er preget av slike reaksjonskomponenter som standard og påvisbare antigener, bufferløsning, isotopmerkede antistoffer, visse antistoffer som binder seg til sorbenten. Et antigen tilsettes antistoffene som skal testes. Etter inkubering oppstår antigen-antistoffkomplekser, sorbenten vaskes, merkede antistoffer tilsettes som binder seg til antigenet i komplekset. Radioaktiviteten avhenger av konsentrasjonen av antigenet som testes.
  2. Kompetitiv radioimmunoassay er drevet av antigenkonkurranse. Her er det slike komponenter i reaksjonen som kontroll- og bestemte antigener, en bufferløsning, visse antistoffer som binder seg til sorbenten, samt et isotopmerket antigen. Diagnose begynner med introduksjonen av antigenet som undersøkes. Et antigen-antistoffkompleks dannes på sorbenten. Deretter vaskes sorbenten, og det merkede antigenet injiseres. Ved å gjøre det binder den seg til antistoffet. Ved hjelp av tellere måles reaksjonen og mengden radioaktivitet. Det vil være i omvendt proporsjon med mengden antigen i prøven.
  3. Den indirekte metoden er den vanligste. I dette tilfellet har radioimmunoanalysen av reaksjonskomponenten slik som kontroll- og testserum, antigener eller antistoffer som er bundet på sorbenten, antistoffer merket med isotoper, bufferløsninger. Antistoffer eller antigener som er diagnostisert reagerer med antigener eller antistoffer som er bundet til sorbenten. Deretter fjernes inkubatet, merkede antistoffer injiseres, som binder seg tilantigen-antistoffkomplekser.

Analysemetodikk

Så, radioimmunoassay utføres ved bruk av spesielle reagenser. Settene er standard, så eventuelle feil eller brudd er ikke tillatt. Diagnostiske resultater er pålitelige. Analysen utføres om morgenen, for dette tar de venøst blod fra en person. I laboratoriet separeres serum fra blodet, som skal brukes til RIA. Dette serumet er blandet med reagenser. Den resulterende blandingen inkuberes ved en gitt temperatur i en termostat.

Frie og bundne isotoper separeres i den resulterende blandingen. Deretter undersøkes det mottatte materialet, og resultatene beregnes. Radioimmunoanalysemekanismen har flere alternativer. Teknikken beskrevet ovenfor er en væskefase RIA, siden alle komponenter er i flytende tilstand. Det er RIA og fast-fase, hvor antistoffer plasseres i en bærer som ikke løses opp i væske.

radioimmun blodprøve
radioimmun blodprøve

Tilgjengelighet av diagnostikk

Bruken av denne diagnosemetoden i medisin blir mer og mer populær for hvert år. Nylig har radioimmunoassay blitt en standard diagnostisk metode som kan foreskrives av en lege ved en endelig diagnose. I lang tid ble denne typen analyser bare utført i laboratorier, i dag har det blitt en vanlig forskningsmetode. Men RIA krever bruk av dyrt utstyr (gammatellere), og reagenssett har kort levetid. Alt dette er hovedulempen med en slik analyse, som bestemmer densdyr pris.

I tillegg har RIA nylig begynt å erstatte mer moderne forskningsmetoder som ikke krever interaksjon med isotoper. Disse inkluderer enzymimmunoassay. Derfor er RIA ønskelig i mange klinikker. Den har lenge vært brukt i store byer og diagnostiske sentre, men på vanlige sykehus i små byer blir denne analysen praktisk t alt ikke brukt på grunn av den høye kostnaden.

radioimmunoassay-komponenter
radioimmunoassay-komponenter

Dignity of RIA

Radioimmunoassay har mange fordeler. Det er ganske spesifikt og har høy følsomhet, noe som gjør det mulig å bestemme tilstedeværelsen av biologisk aktive stoffer i utrolig små mengder. Denne analysen utføres veldig enkelt, en person er bare pålagt å donere venøst blod. Testresultatene er 100 % nøyaktige og klare allerede neste dag. RIA kan også enkelt automatiseres. Dermed lar denne analysen deg identifisere proteiner som er avfallsprodukter fra smittsomme bakterier, noe som indikerer tilstedeværelsen av infeksjon i kroppen.

radioimmun analyse av målet om å sette komponentene fremdriftsregnskap
radioimmun analyse av målet om å sette komponentene fremdriftsregnskap

Diagnosis in Virology

Den mest lovende RIA er for virologi, fordi den lar deg raskt identifisere virale patogener. Dette skyldes at de siste årene har forekomsten av ulike infeksjoner økt, som sprer seg i høy hastighet og forårsaker dødelighet blant mennesker. Dette gjelder spesielt for land som ikke har en høysosial og økonomisk utvikling (landene i Fjernøsten), radioimmunoassay er rett og slett uunnværlig her. Mikrobiologi bruker også denne diagnosemetoden for å oppdage infeksjonssykdommer forårsaket av patogene bakterier. For eksempel er RIA mye brukt for å oppdage tyfoidfeber. I de første dagene av sykdommen, før utnevnelsen av behandling, er det nødvendig å gjennomføre en studie av avføring og oppkast. Imidlertid vil de diagnostiske resultatene bli oppnådd etter lang tid. Her kommer RIA til unnsetning, analysen lar deg identifisere årsaken til sykdommen på kort tid. En person donerer blod, neste dag er resultatene av studien klare. Denne analysen hjelper deg med å stille en nøyaktig diagnose.

Resultater

Radioimmunoassay er for tiden en av de mest sensitive diagnostiske metodene. Den brukes til å analysere ethvert stoff som antistoffer kan oppnås mot. Denne metoden gjør det mulig å ta mange prøver i det minste volumet av den undersøkte væsken, samt å registrere resultatene på kortest mulig tid, siden den kan fullautomatiseres. Denne analysen ble utviklet på 1950-tallet av Solomon Burson. Tretti år senere ble det utbredt. Til dags dato er det ikke et hundre prosent alternativ til RIA, siden analysen har høy sensitivitet. RIA brukes i ulike grener av medisinen, så vel som i mikrobiologi og virologi.

radioimmunoanalysemekanisme
radioimmunoanalysemekanisme

Endelig

Bruken av metoden i virologi er svært aktuell i dag, som den girevnen til å undersøke spredning av infeksjoner, stille en nøyaktig diagnose og foreskrive spesifikk behandling. Dette problemet er spesielt relevant for land som har et lavt nivå av økonomi og sosial utvikling. Denne analysen lar deg også oppdage mengden hormoner og enzymer i menneskekroppen. For å få pålitelige resultater trenger forskeren bare å donere blod for analyse. Medisinen står ikke stille, sammen med radioimmunoassay dukker det opp nye forskningsmetoder, men RIA fortsetter å være en av lederne innen medisinsk diagnostikk.

Anbefalt: