Forskning på bakterier krever grundig arbeid med en rekke utstyr og instrumenter. For at mikroorganismer skal formere seg så raskt som mulig under laboratorieforhold og for å kunne opprettholde normal vital aktivitet, brukes spesielle næringsmedier. Deres sammensetning og biofysiske forhold er egnet for aktiv vekst av en bakteriekultur.
Næringsmedier. Mikrobiologi og andre applikasjoner
Bakteriekolonier dyrkes i laboratoriet på petriskåler fylt med geléaktig eller halvflytende innhold. Dette er næringsmedier, hvis sammensetning og egenskaper er så nær naturlige som mulig for høykvalitets avlingsvekst.
Slike miljøer brukes i mikrobiologisk forskning og i medisinske diagnostiske laboratorier. Sistnevnte arbeider oftest med utstryk av patogene eller opportunistiske bakterier, hvis systematiske plassering bestemmes direkte i institusjonen.
Naturlig og syntetiskonsdag
Grunnregelen for å arbeide med bakterier er riktig valg av næringsmedium. Den må oppfylle en rekke kriterier, inkludert innholdet av mikro- og makroelementer, enzymer, konstant surhetsverdi, osmotisk trykk og til og med prosentandelen oksygen i luften.
Næringsrike medier er klassifisert i to store grupper:
- Naturlige miljøer. Slike blandinger er tilberedt av naturlige ingredienser. Dette kan være elvevann, plantedeler, gjødsel, grønnsaker, plante- og dyrevev, gjær osv. Slike miljøer kjennetegnes av et høyt innhold av naturlige kjemikalier, hvis variasjon fremmer veksten av bakteriekultur. Til tross for disse åpenbare fordelene, tillater ikke naturlige miljøer spesialisert forskning med spesifikke bakteriestammer.
- Syntetiske medier. De er forskjellige ved at deres kjemiske sammensetning er kjent i nøyaktige forhold mellom alle bestanddeler. Slike medier er forberedt for en spesifikk kultur av bakterier, hvis metabolisme er kjent på forhånd for forskeren. Av denne grunn er det faktisk mulig å forberede et slikt syntetisk miljø for utvikling av mikroorganismer. De brukes til å analysere den vitale aktiviteten til bakterier. Du kan for eksempel finne ut hvilke stoffer de slipper ut i miljøet og hvor mye. Mikroorganismer vil også vokse i naturlige medier, men det er umulig å spore noen kvantitative endringer i sammensetningen på grunn av uvitenhet om de opprinnelige proporsjonene av stoffer.
Differensial-diagnostiske miljøer
I arbeid med bakterier kan ikke bare vanlige næringsmedier brukes. Mikrobiologi er en enorm vitenskap, og derfor, når du utfører en studie, er det noen ganger nødvendig å foreta et utvalg av mikroorganismer av en eller annen grunn. Bruken av differensialdiagnostiske medier i laboratoriet gjør det mulig å velge de ønskede bakteriekoloniene på en petriskål i henhold til det biokjemiske tegnet på deres vitale aktivitet.
Sammensetningen av slike miljøer inkluderer alltid følgende komponenter:
1. Næringsstoffer for cellevekst.
2. Analysert substrat (stoff).
3. En indikator som vil gi en karakteristisk farge når en bestemt reaksjon oppstår.
Et eksempel er det differensialdiagnostiske næringsmediet "Endo". Det brukes til å velge kolonier av bakterier som kan bryte ned laktose. I utgangspunktet har dette mediet en rosa farge. Hvis en koloni av mikroorganismer ikke er i stand til å bryte ned laktose, får den den vanlige hvite fargen. Hvis bakteriene kan bryte ned dette substratet, blir de til en karakteristisk knallrød farge.
Valgfag onsdager
Diagnostiske laboratorier arbeider ofte med vattpinner som inneholder mange forskjellige typer bakterier. For kvalitetsarbeid er det åpenbart nødvendig å på en eller annen måte velge koloniene vi trenger fra dusinvis av utenforstående. Det er her et bakterievekstmedium kan hjelpe, som er ideelt formulert for å støtte bare én type mikroorganisme.
For eksempel,et slikt valgbart miljø er bare egnet for reproduksjon av Escherichia coli. Så, fra å så mange bakterier på en petriskål, vil vi bare se kolonier av den samme Escherichia coli og ikke flere. Før du starter arbeidet, er det nødvendig å kjenne metabolismen til den studerte bakterien godt for å kunne velge den fra en blanding av andre arter.
Fast, halvfast og flytende kulturmedier
Bakterier kan dyrkes ikke bare på faste underlag. Næringsmedier skiller seg fra hverandre i deres aggregeringstilstand, som avhenger av sammensetningen under produksjonen. Til å begynne med har de alle en flytende konsistens, og når gelatin eller agar tilsettes i en viss prosentandel, stivner blandingen.
Flytende kulturmedier finnes vanligvis i reagensrør. Hvis det blir nødvendig å dyrke bakterier under slike forhold, tilsett en løsning med en kulturprøve og vent 2-3 dager. Resultatet kan variere: det dannes et bunnfall, det kommer en film, små flak flyter eller det dannes en uklar løsning.
Tett kulturmedium brukes ofte i mikrobiologisk forskning for å studere egenskapene til bakteriekolonier. Slike medier er alltid gjennomsiktige eller gjennomskinnelige slik at det er mulig å korrekt bestemme fargen og formen på kulturen av mikroorganismer.
Medieforberedelse
Underlag som kjøtt-peptonblandinger basert på buljong, gelatin eller agar er veldig enkle å tilberede. Hvis du trenger å lage et fast eller halvflytende substrat, til en væsketilsett henholdsvis 2-3% eller 0, 2-0, 3% gelatin eller agar. De spiller en stor rolle i herdingen av blandingen, men de er ikke en kilde til næringsstoffer. Dermed oppnås næringsmedier som er egnet for vekst av en bakteriekultur.
